Purificación y caracterización parcial de la glutamina sintetasa de nódulos radicales de haba.
Palabras clave:
Glutamina sintetasa, Isoenzimas, Nódulos, Raíces, Vicia fabaResumen
La glutamina sintetasa (GS, EC 6.1.3 .2) de la fracción vegetal de nódulos radicales
de Vicia f aba L. se ha purificado hasta homogeneidad aparente utilizando cromatografía
de afmidad con sefarosa-antranílico . El enzima está compuesto de tres polipéptidos
diferentes de 40 kDa y presenta un peso molecular nativo de 310-330 kDa,
determinado por cromatografia de exclusión molecular y electroforesis nativa en gradiente
de poliacrilamida, respectivamente, y mostró reacción cruzada con anticuerpos
obtenidos frente a la GS de nódulos de Phaseolus vulgaris. Dos isoenzimas, GSn- I y
GSn-2, fueron separadas en nódulos mediante cromatografia de intercambio aniónico
en Q-sefarosa, mientras que sólo una pudo ser identificada en raíz. Todas ellas mostraron
idéntico número de subunidades y peso molecular nativo. La relación de actividad
transferasa-semibiosintética fue , para las tres isoformas de GS, inusual mente baja. La
abuandancia del enzima en nódulos fue cuantificada mediante densitometría y representó
aproximadamente el 5% de la proteína soluble extraída. Se discute la posible
significación de estas y otras características del enzima en V. f aba.
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Citas
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