Localización de epítopos en distintos antígenos de Leishmania infantum. Aplicación en el desarrollo de un sistema de diagnóstico serológico
Palabras clave:
Leishmania infantum, Antígenos, Diagnóstico, Proteínas ácidas, Histonas, péptidosResumen
En este trabajo se describe la caracterización de cinco proteínas antigénicas de Leíshmania infantum, el agente etiológico de la leishmaniosis visceral canina en España. Las proteínas aisladas fueron dos histonas, la H2A y la H3, y tres proteínas ribosomales de la familia de las proteínas ácidas, la LiP2a, LiP2b y LiPO. Todas ellas se caracterizaron tras el aislamiento de los genes que las codificaban en forma de cDNAs contenidos en librerías construidas en fagos egtll. El aislamiento se llevó a cabo tras rastrear las librerías con sueros obtenidos de perros infectados de forma natural por el parásito. El análisis de secuencia mostró que aunque estas proteínas en Leishmania poseían un carácter conservado existían regiones donde aparecían secuencias específicas para el parásito. Precisamente fue en estas regiones donde se localizaron los determinantes antigénicos de las diferentes proteínas. Con el fin de desarrollar un sistema de diagnóstico serológico de la leishmaniosis canina, las regiones antigénicas de las cinco proteínas fueron expresadas y purificadas como polipéptidos recombinantes. La utilización de estos antígenos recombinantes en ensayos de ELISA demostró la potencialidad del uso de estas proteínas para el desarrollo de sistemas de diagnóstico serológico sensibles y específicos de la leishmaniosis canina.
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